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腫瘤組織的原代細(xì)胞培養(yǎng)有哪些注意事項(xiàng)？

原代培養(yǎng)是直接從生物體組織或器官的一部分進(jìn)行培養(yǎng)，也稱初代培養(yǎng)。腫瘤組織的原代細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)為腫瘤研究及治療提供充足的細(xì)胞來源是癌癥在體外研究的重要工具，與體內(nèi)研究相輔相成。但目前腫瘤細(xì)胞原代培養(yǎng)成功率不高的許多問題還需繼續(xù)探討與研究。腫瘤組織的原代細(xì)胞培養(yǎng)有哪些注意事項(xiàng)？讓我們一起來看看吧！注意點(diǎn)一：取材部位的選擇非常重要，應(yīng)在癌細(xì)胞集中、細(xì)胞活力較好的部位取材，盡量避免在壞死區(qū)取材；注意點(diǎn)二：取材后應(yīng)盡快培養(yǎng)，最好不要超過24h，如需耽擱時(shí)間，可將組織塊于培養(yǎng)液中浸泡，放置...

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核酸提取(磁珠法)常見的六大問題

核酸提取的方法很多，如煮沸裂解法、酚氯仿抽法、濃鹽法、陰離子去污劑法、異硫氰酸胍/苯酚法（Trizol法）、CTAB法原理（植物DNA提取經(jīng)典方法）、離心柱純化、磁珠法提取等，今天我們來看看核酸提取(磁珠法)常見的六大問題，從而更好的了解磁珠法提取核酸。Q：是不是誤區(qū)越多，提取效果越好？A：不是，磁珠的主要特點(diǎn)是既可以分散于液體中，也可以在外加磁場作用下以固態(tài)方式和液相分離，ren何試劑體系，磁珠和液體的比例都應(yīng)該是有一定閾值的，超過一定的比例，過多的磁珠將因?yàn)闊o法均勻分散于...

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Elisa的檢測方法有哪些？

酶聯(lián)免疫吸附測定（enzymelinkedimmunosorbentassay，簡寫ELISA或ELASA）指將可溶性的抗原或抗體結(jié)合到聚苯乙烯等固相載體上，利用抗原抗體特異性結(jié)合進(jìn)行免疫反應(yīng)的定性和定量檢測方法。Elisa的檢測方法有哪些？讓我們一起來看看吧！常見的有直接法、間接法、競爭法基雙抗夾心法，其中直接法和競爭法應(yīng)用較少，應(yīng)有最多的是雙抗夾心法，讓我們一一來看看它們是如何操作的吧！一、直接法將抗原固定于ELISA班上，然后用酶標(biāo)抗體直檢測抗原。相較于其他類型的ELI...

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如何利用流式進(jìn)行細(xì)胞凋亡（Cell Apoptosis）分析

磷脂酰絲氨酸(Phosphatidylserine,PS)是一種細(xì)胞膜活性物質(zhì)，正常細(xì)胞中，其位于細(xì)胞膜脂質(zhì)雙層內(nèi)側(cè),在細(xì)胞凋亡的早期，PS可從細(xì)胞膜的內(nèi)側(cè)翻轉(zhuǎn)到細(xì)胞膜的表面。凋亡早期：磷脂膜(PS)外翻，但是細(xì)胞膜保持完整性，因此PI（與DNA結(jié)合）染色為陰性。AnnexinV是一種磷脂結(jié)合蛋白，與磷脂酰絲氨酸有高度親和力，可以與凋亡早期外翻的磷脂膜(PS)結(jié)合。凋亡中晚期：磷脂膜(PS)外翻，但是細(xì)胞膜被破壞，AnnexinV和PI分別與磷脂酰絲氨酸和DNA結(jié)合。壞死細(xì)胞...

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Lipo3000細(xì)胞轉(zhuǎn)染的實(shí)驗(yàn)步驟及注意事項(xiàng)

細(xì)胞轉(zhuǎn)染常用的轉(zhuǎn)染試劑很多，其中，Lipo3000深受廣大科研工作者的喜愛，那我們來看看Lipo3000細(xì)胞轉(zhuǎn)染的實(shí)驗(yàn)步驟及注意事項(xiàng)吧！一、實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備Lipofectamine™3000轉(zhuǎn)染試劑（ThermoFisher）、Opti-MEM（可以用無血清的培養(yǎng)基代替）二、實(shí)驗(yàn)步驟1.接種細(xì)胞，使其在轉(zhuǎn)染時(shí)達(dá)到70–90%匯合度。注：對于HEK293，6孔板一般鋪50萬個(gè)細(xì)胞左右。對于PC9,24孔板一般鋪5-10萬個(gè)細(xì)胞。由于不同細(xì)胞，生長狀況不太一樣，需要根據(jù)情...

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