技術(shù)文章
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活體轉(zhuǎn)染,就是動物體的轉(zhuǎn)染。通常,體內(nèi)核酸遞送的載體形式主要有兩種:病毒載體、非病毒載體。病毒載體通常包括腺病毒、慢病毒等。非病毒載體通常包括脂質(zhì)體、陽離子聚合物等。病毒載體具有遞送效率高、靶向性等優(yōu)點,但缺點也較多:操作復(fù)雜、費用高、實驗周期長、存在生物安全性問題、質(zhì)粒大小受限等。對比與病毒載體,非病毒載體就不存在上述問題,但是非病毒缺乏靶向性,因此,對于難轉(zhuǎn)染的細(xì)胞或器官就具有一定的挑戰(zhàn)性?;铙w轉(zhuǎn)染新途徑——Polyplus活體轉(zhuǎn)染試劑,完m的解決了上述問題。polypl...
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蛋白純化,是一項既復(fù)雜又嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ鳎诒WC純度外,還要求保持其生物學(xué)活性。蛋白質(zhì)純化常見的方法有:親和層析法、離子交換層析法、疏水層析法、凝膠過濾層析法等。蛋白質(zhì)純化方法之親和層析法,主要依靠蛋白質(zhì)與介質(zhì)配體間特異性的可逆結(jié)合作用進(jìn)行分離。配體可直接與目標(biāo)蛋白質(zhì)結(jié)合,也可以與蛋白質(zhì)共價結(jié)合的標(biāo)簽結(jié)合。親和層析通常是一種最粗放的純化過程,一般在純化工藝的前期應(yīng)用?;诤罄m(xù)應(yīng)用的要求,可能只需要一步親和層析即可獲得純度合格的蛋白質(zhì)。蛋白質(zhì)純化方法之離子交換層析法,主要基于其凈電荷...
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轉(zhuǎn)染是將具有生物功能的核酸轉(zhuǎn)移或者運送到細(xì)胞內(nèi)并使核酸在細(xì)胞內(nèi)維持其生物功能,包括化學(xué)方法(如磷酸鈣共沉淀、脂質(zhì)體、陽離子聚合物PEI)和物理方法(如電穿孔)。Polyp*供應(yīng)商,包括多種產(chǎn)品線,其中用于mRNA遞送的有jetMESSENGER®和invivo-jetRNA®+。陽離子脂質(zhì)體mRNA遞送載體新選擇——invivo-jetRNA®+是一個高效、穩(wěn)定和安全的遞送系統(tǒng),可實現(xiàn)100%mRNA包裝(圖1A),媲美LNP遞送(圖1B)。圖1inv...
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pei轉(zhuǎn)染試劑廣泛應(yīng)用于多種細(xì)胞系包括293、CHO-K1、COS-1、COS-7、NIH/3T3、Sf9、HepG2和Hela細(xì)胞等。pei轉(zhuǎn)染試劑如何配置呢?一、pei轉(zhuǎn)染試劑配置前準(zhǔn)備:(1)通過胰酶消化收集細(xì)胞,用適當(dāng)?shù)耐阸培養(yǎng)基以4×105至8×105細(xì)胞/cm2的密度平鋪細(xì)胞于60mm組織培養(yǎng)皿上(根據(jù)實驗需要選擇培養(yǎng)皿,使細(xì)胞貼壁后所占總面積達(dá)到培養(yǎng)皿面積的70-90%)。(2)根據(jù)細(xì)胞貼壁情況于含5%CO2的37℃溫箱中孵育8-24h,當(dāng)細(xì)胞貼壁完q后即可開始...
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1.簡介DEAE離子交換色譜填料SepFastHighRes是一組弱陰離子交換色譜填料。DEAE離子交換色譜填料SepFastHighRes專為生物分子的高分辨率純化而設(shè)計,其中不純的成分很難通過普通的生物處理色譜填料分離。DEAE離子交換色譜填料SepFastHighRes在配體密度、負(fù)載量和單個組分的分離能力之間進(jìn)行了平衡設(shè)計,適用于大規(guī)模生物制造應(yīng)用。DEAE離子交換色譜填料SepFastHighRes的基礎(chǔ)基質(zhì)由高度交聯(lián)的較小尺寸(20-50µm)的瓊脂糖...
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