老师含着我的奶边摸边做,亚洲码国产精品高潮在线 ,性欧美videofree另类,亚洲熟妇AV一区二区三区浪潮

免費咨詢熱線:
技術文章
首頁 > 技術中心 > 細胞克隆實驗原理及實驗方法

細胞克隆實驗原理及實驗方法

 更新時間:2024-10-08 點擊量:763

細胞克隆形成實驗是用來檢測細胞增殖能力、侵襲性、對殺傷因素敏感性等項目的重要技術方法。

一、實驗原理

接種細胞后,只有同時具有貼壁和增殖活力的細胞才會形成克隆??寺⌒纬陕史从臣毎莫毩⑸婺芰Φ膹娙酰糜谠u價細胞群體依賴性和增殖能力??寺⌒纬陕逝c接種密度有一定關系,在進行測定時需要將接種的單個細胞分散為懸液,并直接接種在培養(yǎng)皿中進行持續(xù)一周以上的培養(yǎng),并在此期間進行檢查。當出現新的、由單個原始生長出來的完整幾何結構時,則可以停止培養(yǎng)過程。

克隆形成依據采用的培養(yǎng)介質的不同,分為平板克隆和軟瓊脂克隆兩類。

二、實驗方法

1. 平板克隆實驗6孔板為例

1將處于對數生長期的細胞胰酶消化后,wanquan培養(yǎng)基(基礎培養(yǎng)基+10%胎牛血清)重懸成細胞懸液,并計數;

2細胞接種:于6孔板培養(yǎng)板中各實驗組接種400-1,000個細胞/孔(根據細胞生長情況確定,一般為700個細胞/孔);

3繼續(xù)培養(yǎng)到14天或絕大多數單個克隆中細胞數大于50為止,中途每隔3天進行換液并觀察細胞狀態(tài);

4克隆完成后,在顯微鏡下對細胞進行拍照,然后PBS洗滌1次,每孔加入1 mL 4%多聚甲醛固定30-60 min,PBS洗滌1次;

5每孔加入結晶紫染液1ml,染細胞10-20 min;

6PBS 洗滌細胞數次,晾干,數碼相機拍照(分別對整個六孔板及每個孔進行單獨拍照)。

2. 軟瓊脂克隆實驗

1配制1.2% 0.7%瓊脂,高壓滅菌后,維持在42℃中使其不會凝固;

21.2% 瓊脂與培養(yǎng)基混合,鋪入6孔板作為下層膠,每孔1.5ml,37°C孵育30 min使之凝固;

3將制備好的單細胞懸液與0.7%瓊脂充分混勻,加入6孔板作為上層膠,每孔1.5ml。待其凝固后,再在上面加入培養(yǎng)基,每3天更換一次;

4根據細胞的生長速度培養(yǎng)2~3周后顯微鏡下觀察克隆大小,與平板克隆一樣,每個克隆>50個細胞,顯微鏡拍照。若拍整個孔,每孔加入200μl氯化硝基四氮唑藍(NBT)染色,37°C過夜,拍照。

更多有關細胞克隆實驗原理及實驗方法,請聯系細胞克隆實驗產品供應商——北京百奧創(chuàng)新科技有限公司!

百奧創(chuàng)新(無電話無二維碼).png



丰满人妻熟妇乱偷人无码| 国产精品无码无卡无需播放器| 国产精品美女久久久| 国产精品99久久久久久WWW| 青苹果乐园在线观看| 娇小搡BBBB搡BBBB| 日本A片成人片免费视频生活片| 无码人妻久久一区二区三区免费丨| 日韩AV无码一区二区三区不卡| 国产精品沙发午睡系列99| 国产成人精品视频a片西瓜视频| 猛烈H继攵禁忌H| 极品人妻洗澡后被朋友玩| 真人做爰45分钟| 俄罗斯ZOOM人与ZOOM| 国产猛男gaygayxxgv| 国产成人AAAAA级毛片| 亚洲精品v天堂中文字幕| 和子发生了性关系的免费视频 | 久久久GOGO无码啪啪艺术| 日本欧美大码一区二区免费看| 免费观看a级片| 日韩中文字幕区一区有砖一区| 99精品人妻无码专区在线视频区| 欧美18VIDEOSEX性欧美| 美国色情三级欧美三级| 亚洲国产成人久久精品大牛影视| 亚洲爽爽爽爽爽成人网站| 99RE在线播放| 99久久精品国产一区二区三区| 久久久久久久精品免费看A片| 日本三级片在线观看| 成人A片产无码免费视频奶头| 妇与子乱肉肉视频| 久爱WWW人成免费网站下载| 亚洲精品乱码久久久久久| 美女直播全婐网站免费| 伊人久久大香线蕉AV一区二区| 狂野欧美激情性XXXX| 免费高清A级毛片在线播放| Y111111少妇影院无码|