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凡知醫(yī)學高保真PCR預混液原理

 更新時間:2024-09-03 點擊量:510

一、凡知醫(yī)學高保真PCR預混液目錄表

貨號

產(chǎn)品

規(guī)格

FG2207

高保真PCR預混液

1ml

二、凡知醫(yī)學高保真PCR預混液原理

凡知高保真PCR預混液的原理主要基于PCR技術、高保真DNA聚合酶的使用,以及特定的緩沖體系和添加劑,以確保高特異性和高保真性。

1. PCR技術

聚合酶鏈式反應PCR)技術,這是一種在體外酶促擴增特定DNA片段的技術,類似于DNA的天然復制過程。PCR技術利用一對與模板DNA兩端互補的寡核苷酸引物,在DNA聚合酶的作用下,沿著模板鏈延伸至完成新的DNA合成,不斷地重復這一過程,使目的DNA片段以指數(shù)級進行擴增。引物與DNA片段的特異結合決定了擴增的特異性。其主要過程由變性、退火和延伸三個步驟反復循環(huán)組成,每循環(huán)一次,雙鏈DNA分子數(shù)量即增加一倍?

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2. 高保真DNA聚合酶

凡知高保真PCR預混液包含Hieff Canace Plus High-Fidelity DNA Polymerase,這是一種具有高保真性的酶,其保真性是Taq DNA聚合酶83倍,是普通Pfu DNA聚合酶9倍。這種酶具有5’→3’DNA聚合酶活性和3’→5’核酸外切酶活性,后者能夠校正錯誤,從而提高PCR產(chǎn)物的保真性。預混液中還添加了延伸因子,使得該酶具有長片段擴增能力,擴增目的片段的長度可達13 kb

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3. 特定的緩沖體系和添加劑

預混液中添加了常溫可抑制聚合酶活性和3’→5’核酸外切酶活性的兩種單克隆抗體,這簡化了實驗步驟,使得高特異性的Hot Start PCR變得簡便易行。凡知醫(yī)學的高保真PCR預混液還可能包含電泳指示染料,使得PCR產(chǎn)物可以直接進行電泳檢測,簡化了實驗步驟,提高了實驗效率。此外,該產(chǎn)品還可能含有特異保護劑,使得預混液在反復凍融后仍能維持穩(wěn)定活性,保證了實驗的可靠性和重復性?。該預混液還具有快速簡便、靈敏度高、特異性強、穩(wěn)定性好等優(yōu)點,反應體系只需加入引物和模板即可,并通過兩步法的程序進行擴增。產(chǎn)品中還含有電泳指示染料,使得PCR產(chǎn)物可直接進行電泳檢測。此外,該產(chǎn)品還含有特異保護劑,使得預混液反復凍融后仍可維持穩(wěn)定活性。

總的來說,凡知高保真PCR預混液通過使用PCR技術高保真DNA聚合酶以及電泳指示染料和特異保護劑的添加,實現(xiàn)了高效、高保真的PCR擴增反應,適用于復雜模板的擴增,擴增產(chǎn)物為平末端,為分子生物學研究提供了高效且可靠的工具


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