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Elabscience MTT細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒怎么用?

 更新時(shí)間:2023-12-27 點(diǎn)擊量:759

Elabscience MTT細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性檢測(cè)。那么你知道Elabscience MTT細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒該怎么用嗎?讓我們一起來(lái)看看吧!

1. 準(zhǔn)備工作

本試劑盒中 MTT (5×)為濃縮液,實(shí)驗(yàn)前稀釋成 1×工作液。例如:取 100 μL MTT (5×),加入 400 μL

MTT Diluent Buffer,混勻后即為1×MTT 工作液。

2. 取生長(zhǎng)狀態(tài)良好的細(xì)胞,調(diào)整細(xì)胞密度,按每孔100 μL 細(xì)胞懸液接種于96 孔板中,同時(shí)設(shè)空白孔(不加細(xì)胞但是加入同體積的培養(yǎng)基)。

注:通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100 μL約含2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100 μL約含5000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。

3. 根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)對(duì)細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)和處理。

4. 每孔加入 50 μL 的 1×MTT 工作液。繼續(xù)孵育 1~4 h,使 MTT 還原為甲臜。

注:MTT孵育條件與細(xì)胞培養(yǎng)條件相同。

5. 小心吸出上清液,每孔加入 150 μL 的 DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

6. 用酶標(biāo)儀測(cè)定在 570 nm 處的吸光度。

7. 結(jié)果計(jì)算

圖片2.png

[注]:

ODsample: 實(shí)驗(yàn)孔的OD值

ODcontrol: 對(duì)照孔的OD值

ODblank: 空白孔的OD值

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