老师含着我的奶边摸边做,亚洲码国产精品高潮在线 ,性欧美videofree另类,亚洲熟妇AV一区二区三区浪潮

免費(fèi)咨詢熱線:
技術(shù)文章
首頁 > 技術(shù)中心 > NEB T4 DNA連接酶使用說明書

NEB T4 DNA連接酶使用說明書

 更新時(shí)間:2023-06-13 點(diǎn)擊量:5831

NEB T4 DNA連接酶protocol:

1、在微型離心管(冰上)中設(shè)置以下反應(yīng):

(T4 DNA連接酶應(yīng)最后添加。注意:表中顯示了使用1mol:3mol插入zhi定DNA大小的載體的連接。)


成分

20 μl 反應(yīng)

T4 DNA連接酶緩沖液 (10X)*

2 μl

載體 DNA (4 kb)

50 ng (0.020 pmol)

Insert DNA (1 kb)

37.5 ng (0.060 pmol)

無核酸酶水

to 20 μl

T4 DNA 連接酶

1 μl


**注意:T4 DNA連接酶緩沖液應(yīng)在室溫下解凍并重懸。

2、通過吸管上下輕輕混合反應(yīng)物,并短暫地進(jìn)行微量離心。

3、對(duì)于粘性(粘性)末端,在16°C下孵育過夜或室溫下孵育10分鐘。

4、對(duì)于鈍端或單堿基懸突,在16°C下孵育過夜或室溫下孵育2小時(shí)(或者,高濃度T4 DNA連接酶可用于10分鐘的連接)。

5、在65°C下加熱滅活10分鐘。

6、在冰上冷卻,將1-5μl的反應(yīng)轉(zhuǎn)化為50μl的感受態(tài)細(xì)胞。

NEB T4 DNA連接酶使用時(shí)的注意事項(xiàng):

1、ATP 是反應(yīng)中必不ke少的輔因子。這與需要 NAD 作為輔因子的 E. coli DNA 連接酶不同。

2、若需稀釋 T4 DNA 連接酶,推薦使用含 50% 甘油的貯存緩沖液(稀釋緩沖液 A,NEB #B8001S)稀釋,然后于 -20℃ 貯存。如稀釋后立即使用,也可以使用 1X T4 DNA 連接酶反應(yīng)緩沖液稀釋。

3、連接反應(yīng)可以在添加 1 mM ATP 的四種限制性內(nèi)切酶緩沖液的任何一種或在 T4 多聚核苷酸激酶(T4 PNK)緩沖液中進(jìn)行。

4、室溫連接。

有關(guān)更多NEB T4 DNA連接酶的介紹,請(qǐng)聯(lián)系百奧創(chuàng)新客服!

NEB T4 DNA連接酶代理——北京百奧創(chuàng)新科技有限公司,成立于2017年,由經(jīng)驗(yàn)豐富的技術(shù)團(tuán)隊(duì)、商業(yè)團(tuán)隊(duì)及管理團(tuán)隊(duì)組建而成,專注于免疫學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、分子生物學(xué)等領(lǐng)域核心試劑產(chǎn)品的研發(fā)、生產(chǎn)與銷售基于“客戶第一"的核心理念,百奧創(chuàng)新在產(chǎn)品自主研發(fā)的同時(shí),也與全球多家生命科學(xué)試劑供應(yīng)商建立良好的合作關(guān)系,向全球10,000+客戶提供200,000+優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品。百奧創(chuàng)新將以品質(zhì)樹立品牌,以服務(wù)贏得口碑,致力于成長(zhǎng)為重要的生物化學(xué)試劑開發(fā)與成果轉(zhuǎn)化的kai tuo zhe,并成為行業(yè)ling xian的優(yōu)質(zhì)品供應(yīng)商。


锕锕锕锕锕锕~再深一点五种软件 | 三个男人躁我一个阿啊阿广告| 久久泄欲网| 人妻互换一二三区激情视频| 成人电影免费在线观看| 日日碰狠狠添天天爽超碰97| 免费无遮挡无码永久视频| av天堂午夜精品蜜臀av| 一夜新娘第一季全集免费观看| 97精品久久久久中文字幕| 少妇激情一区二区三区视频| AV鲁丝一区鲁丝二区鲁丝三区 | 成人电影免费看| 两个领导在车里吃我奶| 久久96国产精品久久久| 婷婷大伊香蕉五月天视频 | 丰满双乳秘书被老板狂揉捏| 亚洲AV综合色区无码另类小说| 富婆性俱乐部纵欲狂| 国产亚州精品女人久久久久久| 精品久久久久久久久久久AⅤ| 特级毛片爽WWW免费版| 亚洲人成无码WWW久久久| 扒开双腿疯狂进出爽爽爽动态照片 | 人禽杂交18禁网站免费| 性疼痛TUBE小坳交HD| 人妻斩り56歳无码| 亚洲AV乱码久久精品蜜桃| 女人被添全过程A片试看V| 被绑在机器上榨精失禁男男| 一女被多男玩喷潮视频免费看| 久久久久亚洲精品男人的天堂| 日本片在线看的免费网站| 国产大片免费观看软件| 国产韩国日本欧美的品牌SUV| 出差被夫の上司持久侵犯三浦步美| 欧美另类69xxxxx| 朋友出差人妻半推半就滑进| 国产精品无码一区二区三级| 久久伊人蜜桃AV一区二区| 免费看国产曰批40分钟视频网站 |